SafeStain??GelStain??Nucleic Acid GelStain
??????????????????????SafeRed?, SafeView?, SafeStain?和GelStain?為北京富百科生物技術(shù)有限公司注冊(cè)商標(biāo)，未經(jīng)授權(quán)嚴(yán)禁使用！
1. 帶形美觀：富百科專利產(chǎn)品第四代核酸染料SafeStain克服了國外同類染料分不開大片段DNA的缺點(diǎn)，電泳條帶清晰整齊美觀。(發(fā)明專利ZL202210145256.6)
2.方便觀測：用手持紫外燈或者手持藍(lán)光儀都可以隨時(shí)觀察電泳情況。
5. ?Page膠肉眼可觀測條帶(不需要激發(fā)光,包括紫外和藍(lán)光）。
6.????遷移率好：EB小分子很快跑出膠外，所以EB容易導(dǎo)致小DNA片段看不清，大分子SafeStain完全克服這一點(diǎn)。
7.????定量準(zhǔn)確：適用于核酸分子大小的確定和定量，EB對(duì)小DNA片段定量不準(zhǔn)確。
9. 靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對(duì)核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
10.????穩(wěn)定性高：適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中穩(wěn)定。
11.???耐光性強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)室的日常環(huán)境下可以常溫放置24個(gè)月。
13.???操作簡單：與EB用法完全一樣，在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需30?分鐘且無需脫色或沖洗。
14.???適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于?dsDNA、ssDNA?或?RNA?染色。
產(chǎn)品包裝：???SafeStain?10000x Nucleic Acid Gel Stain??500uL/支；????????儲(chǔ)存條件：??室溫避光可保存24個(gè)月。
制膠時(shí)加入SafeStain核酸染料(染料靈敏，每100mL?瓊脂糖溶液中加入10μL SafeStain原裝液即可)。 按常規(guī)方法電泳。
（1）????實(shí)驗(yàn)樣品：質(zhì)粒DNA，DNA marker（國產(chǎn)的DNA marker濃度太高，至少稀釋2～3倍后使用!）
（4）????溴酚藍(lán)指示劑，1%的西班牙瓊脂糖凝膠
（5）????儀器：電泳儀（130v），移液器(0.5~10ul)，凝膠成像儀
（1）????制膠：將0.5g瓊脂糖溶于50mL 1X TBE電泳緩沖液中，加熱至瓊脂糖完全融化。將融好的瓊脂糖溶液室溫放置50℃左右加入5ul的SafeStain凝膠電泳染料，搖勻。
（3）????置膠：待約30分鐘左右膠體充分凝固后，緩慢垂直向上拔起點(diǎn)樣梳子，切勿用力過猛。（夏季適當(dāng)延長凝膠時(shí)間）
（4）????將瓊脂糖凝膠放入電泳槽內(nèi)，加入電泳緩沖液，使電泳緩沖液液面高于凝膠面約1~2mm。
（5）????將混合溴酚藍(lán)指示劑的DNA樣本（1ul溴酚藍(lán)與2ul DNA標(biāo)本混合）加入到點(diǎn)樣孔內(nèi)。
（6）????蓋上電泳槽蓋，開啟電源，使DNA從負(fù)極移向正極恒壓電泳(電壓恒定在120~130v之間，一般可選擇130V)。
（7）????當(dāng)DNA條帶距離點(diǎn)樣孔約1~2cm后關(guān)閉電源，(約30～40分鐘)取出凝膠。
（8）????用?302nm?激發(fā)的?UV?凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。
*注：此方法染色染料用量相對(duì)較少。染料加入膠中可直接使用微波爐加熱，制好的膠溶液可以在室溫下保存直至用完。
ü??染料過于靈敏，建議未知濃度的樣品的稀釋一倍后上樣，特別是含大片段多的樣品。推薦上樣量為50～200ng/泳道(8泳道小膠孔)
ü??與EB相比，SafeStain電泳電壓要低一些，電泳時(shí)電壓不宜過高，一般不要超過130V。跑膠的時(shí)間40～60min。
ü??SafeStain染料和樣品混合后，點(diǎn)樣到瓊脂糖凝膠中，不推薦這種點(diǎn)樣法。
*此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
（1）按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。?（用于膠回收等DNA高濃度的樣品實(shí)驗(yàn)強(qiáng)烈推薦泡染的方法?。?/span>
（4）用?302nm?激發(fā)的?UV?凝膠成像系統(tǒng)或者藍(lán)光儀下觀察結(jié)果。
*注意事項(xiàng)：用泡染法染色時(shí)，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右；1× SafeStain?染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。
三．核酸電泳的PAGE步驟：Page膠實(shí)驗(yàn)室燈光下，肉眼可觀測條帶，不需要外源激發(fā)光（包括紫外和藍(lán)光）。
2）用配置凝膠溶液同一批次的5×TBE灌滿緩沖液槽。用注射器排除凝膠底部的氣泡。
3）用注射器吸取1×TBE沖洗加樣孔。將DNA樣品和適量的6×凝膠上樣緩沖液混合，用微量移液管加入加樣孔。
4）將電極與電源相連（正極接下槽），打開電源一般90V；1～8V/cm。進(jìn)行電泳9h。
5）電泳至標(biāo)準(zhǔn)參照染料遷移至所需位置（一般是電泳到二甲苯完全遷出，溴酚藍(lán)距底邊2～3cm停止）。關(guān)閉電源，拔掉插頭，棄去電泳槽中的電泳液。
6）將凝膠取下來放入，染色皿中，加1X SafeStain的1X緩沖液中的振蕩染色30-60分，放置在紫外檢測即可。
*注意事項(xiàng)：與瓊酯糖凝膠不同，不能用預(yù)染或點(diǎn)染的方法；只能用泡染的方法顯色，由于聚丙烯酰胺比較致密，染料不容易深入，顯色效果沒有瓊酯糖凝膠好。
1）SafeStain同時(shí)適用于紫外成像儀，激光成像儀和藍(lán)光儀,下觀測的核酸電泳染料！
2)?Page膠實(shí)驗(yàn)室燈光下，肉眼可觀測條帶,?不需要外源激發(fā)光（包括紫外和藍(lán)光）。
3)?本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。
4)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗(yàn)服并遵守生物實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程！
