Lipo3K?Transfection Reagent
適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞系)的轉(zhuǎn)染。
1)???????卓越的轉(zhuǎn)染效率—針對較難轉(zhuǎn)染細胞,可將效率提升2~10倍
3)???????高性價比高,同時實現(xiàn)更好的轉(zhuǎn)染結(jié)果
使用方法:?(每次轉(zhuǎn)染一定要進行預(yù)實驗,來摸索最佳條件,?尤其是轉(zhuǎn)染試劑的最佳用量!)
對大多數(shù)細胞來說,轉(zhuǎn)染時高的細胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。
2.按照下表使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Lipo3K-B試劑(建議同時用2管),充分混勻
3.?使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA,制備DNA預(yù)混液,然后添加Lipo3K-A?試劑,充分混勻。
4.?在每管已稀釋的Lipo3K-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例)。
7. 37℃孵育細胞2 - 4天。然后分析轉(zhuǎn)染細胞。
轉(zhuǎn)染siRNA至細胞中時,遵循如上所述的DNA實驗方案,但在稀釋siRNA時不要加入Lipo3K-A試劑(第3步)。
細胞轉(zhuǎn)染注意事項:?細胞/DNA/siRNA每次都不同,建議每次轉(zhuǎn)染一定要進行預(yù)實驗來摸索最佳條件,尤其是轉(zhuǎn)染試劑的最佳用量!
4)???????質(zhì)粒的大小,質(zhì)量和用量對轉(zhuǎn)染效率很關(guān)鍵。
5)???????轉(zhuǎn)染時注意脂質(zhì)體和用量,過量的話對細胞毒性大也容易失敗。
6)???????轉(zhuǎn)染作用6小時一定記得要換含血清的培養(yǎng)基
7)???????培養(yǎng)基以及洗滌細胞和稀釋用的培養(yǎng)基要無血清、無雙抗。
8)???????轉(zhuǎn)染試劑對個別細胞可能有一定毒性,在轉(zhuǎn)染過程由于提高細胞的通透性因而不能在培養(yǎng)答基中添加抗生素。
12)?????一般在轉(zhuǎn)染24-48h,靶基因即在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗?zāi)康模?4-48h后即可進行靶基因表達的檢測實驗。
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!