Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)

細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒?? Cell Counting Kit-8(CCK-8)??富百科的CCK-8試劑盒顏色為粉紅色，保存期更長，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性更好！?是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的甲臜染料(formazan,下圖)，?CCK被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的是水溶性甲臜能直接溶解在培養(yǎng)基中。細(xì)胞增殖越多越快，則培養(yǎng)基的顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。正是利用這一特性開發(fā)的CCK-8試劑盒直接進(jìn)...

詳細(xì)信息

細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒?? Cell Counting Kit-8(CCK-8)

?富百科的CCK-8試劑盒顏色為粉紅色，保存期更長，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性更好！?是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的甲臜染料(formazan,下圖)，?CCK被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的是水溶性甲臜能直接溶解在培養(yǎng)基中。細(xì)胞增殖越多越快，則培養(yǎng)基的顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞，生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。正是利用這一特性開發(fā)的CCK-8試劑盒直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。CCK-8法應(yīng)用非常廣泛，可以用于生物活性因子的活性檢測，抗腫瘤藥物的篩選，細(xì)胞增值的測定，細(xì)胞毒性檢測以及藥敏等與細(xì)胞活性和增殖相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。本試劑盒使用方便，試劑盒包含一管已經(jīng)配制好的水溶性CCK-8溶液，即開即用，無需其他準(zhǔn)備步驟。檢測過程也無需采用額外的步驟去溶解甲臜，可直接使用96孔板或者384孔板在酶標(biāo)儀上檢測，適合大規(guī)模高通量的樣品檢測。

CCK-8法與MTT比較：

CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高，操作簡便，使用安全，重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機(jī)溶劑和放射性同位素，步驟少，無損失，結(jié)果準(zhǔn)確！本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的CCK-8水溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作?。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。

1.MTT實(shí)驗(yàn)生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的，不僅省去了溶解的步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。

2.與MTT方法相比，本方法線性范圍更寬，靈敏度更高。本方法對細(xì)胞無損害，因此加入CCK-8顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)多次測定從而找到最佳測定時(shí)間。

? ? ?3.本方法所用試劑在培養(yǎng)基中比MTT更加穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)效果重復(fù)性好。

4.MTT具有毒性，同時(shí)其生成的甲臜需要有機(jī)溶劑溶解，會對操作人員身體造成危害。本試劑無毒，使用中無需有機(jī)溶劑，操作更加安全。

5.本試劑盒在4℃避光可長期保存，使用無需配制，即開即用。

6.酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾（扣除空白孔即可）

?CCK-8法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較

檢測方法	MTT法	XTT法	WST-1法	CCK-8法
甲臜產(chǎn)物的水溶性	差需要加DMSO溶解	好	好	好
產(chǎn)品性狀	粉末	2瓶溶液	溶液	1瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	現(xiàn)配現(xiàn)用	即開即用	即開即用
檢測靈敏度	一般	較高	較高	高
重現(xiàn)性	差	中等	好	非常好
檢測時(shí)間	較長	較短	較短	最短
檢測波長	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
細(xì)胞毒性	高細(xì)胞形態(tài)完全消失	很低細(xì)胞形態(tài)不變	很低細(xì)胞形態(tài)不變	很低細(xì)胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性	一般	非常差	一般	很好
批量樣品檢測	可以	非常適合	非常適合	非常適合
便捷程度	一般，工作量大	便捷	便捷	非常便捷

保存條件：CCK-8溶液在避光，0-5℃的條件下可以保存一年；?-20℃下保存2年；如需經(jīng)常使用請將試劑存放在0-5℃，為防止背景值增加干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請勿反復(fù)凍融。

特別提醒：

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。

2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗(yàn)服并遵守生物實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程！

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