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Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-FITC/PI 細胞凋亡檢測試劑盒

Annexin V-FITC/PI?細胞凋亡檢測試劑盒?產(chǎn)品介紹:??????磷脂酰絲氨酸(PS)是一種帶負電荷的磷脂,正常細胞中,PS只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡早期,細胞膜PS由脂膜內(nèi)側(cè)翻向細胞膜外側(cè),使PS暴露在細胞膜外表面。Annexin V是一種分子量為35~36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被公認為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。????富百科將Annexin V進行綠色熒光(FITC)標記,以標記了的Annexin V作為探針,利...

Annexin V-FITC/PI?細胞凋亡檢測試劑盒

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產(chǎn)品介紹:

??????磷脂酰絲氨酸(PS)是一種帶負電荷的磷脂,正常細胞中,PS只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細胞凋亡早期,細胞膜PS由脂膜內(nèi)側(cè)翻向細胞膜外側(cè),使PS暴露在細胞膜外表面。Annexin V是一種分子量為35~36kDCa2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被公認為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。
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富百科將Annexin V進行綠色熒光(FITC)標記,以標記了的Annexin V作為探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜,但對凋亡中晚期的細胞和壞死細胞,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此采用Annexin VPI雙染的方法,就可以將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。

屏幕快照 2020-02-20 16.19.19.png

???????????????????? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??1.?細胞凋亡過程中磷脂酰絲氨酸(PS)外翻示意圖

試劑盒組份:

Reagents

20 assays

50 assays

100 assays

Storage

Annexin V-FITC

100 μl

250 μl

500 μl

4°C避光

Propidium Iodide, PI

200 μl

500 μl

1000 μl

4°C避光

Binding Buffer ( 4X?)

4 ml

10 ml

20 ml

4°C

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所需實驗器材:

微量移液器;PBS;不含EDTA的胰酶消化液;低速離心機;流式細胞儀

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注意事項:

1.?????此試劑盒僅供生物實驗研究使用。操作時必須戴口罩/手套/實驗服和其它生化實驗室防護措施。

2.?????微量試劑需離心數(shù)秒將試劑收集至管底后再開蓋取用。

3.?????Propidium IodidePI)有毒,操作時要帶手套,使用時避免與皮膚,眼睛和黏膜接觸。

4.?????Annexin V-FITC含有劇毒成分疊氮化鈉(NaN3,?操作時要帶手套,使用時避免與皮膚,眼睛和黏膜接觸。

5.?????本試劑盒用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量1x105~1x106。

6.?????染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。

7.?????Annixin V檢測凋亡細胞的方法適用于懸浮生長的細胞,如:淋巴細胞等細胞的檢測。對于貼壁生長的細胞,由于在胰酶等消化處理過程中會造成細胞膜的損傷,會造成較高的假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測,可將胰酶消化后的細胞保存在含2%BSAPBS中,防止進一步的損傷。盡管目前,包括國外也有一些單位采用該方法檢測貼壁生長的細胞。我不推薦用該方法檢測。因為其重復性較差,且需要操作時非常小心。

8.?????消化貼壁細胞殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,最終導致染色失敗。

9.?????細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。

特別提醒:

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。

2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!

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