取10～60萬細(xì)胞，重懸于0.5mL細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
加入0.5mL JC-10染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。
在孵育期間，按照每1mL JC-10染色緩沖液（5×）加入4mL蒸餾水的比例，配制適量的JC-10染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
37℃孵育結(jié)束后，600g 4℃離心3～4分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
再用適量JC-10染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
注意：對(duì)于貼壁細(xì)胞，如果希望采用熒光分光光度計(jì)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，可以先收集細(xì)胞，重懸后參考懸浮細(xì)胞的檢測(cè)方法。
在孵育期間，按照每1mL JC-10染色緩沖液（5×）加入4mL蒸餾水的比例，配制適量的JC-10染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
37℃孵育結(jié)束后， 吸除上清，用JC-10染色緩沖液（1×）洗滌2次。加入2mL細(xì)胞培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中可以含有血清和酚紅。
保存條件：-20℃避光保存，盡量避免反復(fù)凍融，有效期一年。超純水和JC-10染色緩沖液（5×）也可4℃保存。
1. JC-10(200×)在4℃或冰浴等較低溫度下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20～25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 裝載完JC-10后用JC-10染色緩沖液（1×）洗滌時(shí)，使JC-10染色緩沖液（1×）保持4℃左右，此時(shí)的洗滌效果較好。
4. JC-10探針裝載完并洗滌后盡量在30分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測(cè)。在檢測(cè)前需冰浴保存。
5. 請(qǐng)勿把JC-10染色緩沖液5×全部配制成JC-10染色緩沖液1×，本試劑盒使用過程中需直接使用JC-10染色緩沖液5×。
6. 如果發(fā)現(xiàn)JC-10染色緩沖液（5×）中有沉淀，必須全部溶解后才能使用，為促進(jìn)溶解可以在37℃加熱。
7. CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒，請(qǐng)注意小心防護(hù)。
8.??本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅！
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