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鈣熒光探針bioFluo-4, AM

鈣熒光探針bioFluo-4, AM

bioFluo-4, AMbioFluo?為北京富百科生物技術(shù)有限公司注冊商標，未經(jīng)授權(quán)嚴禁使用！產(chǎn)品組成：bioFluo-4, AM也之稱為Fluo-4, AM中文名：鈣熒光探針bioFluo-4, AM，CAS#：273221-67-3；分子式：C51H50F2N2O23 =1096.94英文名：1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester? ?產(chǎn)品簡介：分子式：C51H50F2N2O23 ??分子量：1096.94性質(zhì)： 外觀：橙紅色粉末； 純度：≥90%（HPLC）? ? 鈣指示劑是結(jié)合 Ca2+?后顯示熒光增...

bioFluo-4, AM

bioFluo?為北京富百科生物技術(shù)有限公司注冊商標，未經(jīng)授權(quán)嚴禁使用！

產(chǎn)品組成：bioFluo-4, AM也之稱為Fluo-4, AM

中文名：鈣熒光探針bioFluo-4, AM，CAS#：273221-67-3；分子式：C51H50F2N2O23 =1096.94

英文名：1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester?

?

產(chǎn)品簡介：

分子式：C51H50F2N2O23 ??分子量：1096.94

性質(zhì)： 外觀：橙紅色粉末； 純度：≥90%（HPLC）

? ? 鈣指示劑是結(jié)合 Ca2+?后顯示熒光增強的分子。Fluo-3 應(yīng)用在流式細胞分析上，如涉及籠狀螯合劑光活化、第二信使和神經(jīng)遞質(zhì)的實驗以及基于細胞的藥理學篩選，用于 Ca2+?信號轉(zhuǎn)導的空間動力學成像。bioFluo-4 是 fluo-3 的類似物，其中兩個氯取代基被氟取代，導致在 488 nm 波長處的熒光激發(fā)增強，因此熒光信號水平更高。將溶解后的指示劑直接加入含有培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)皿中，即可向細胞加載 AM 酯形式的這類鈣離子指示劑。這些指示劑可用于熒光和共聚焦顯微鏡、流式細胞分析以及微孔板篩選應(yīng)用。?

? ?bioFluo-4是一種將bioFluo-3結(jié)構(gòu)中的Cl替換成F的鈣熒光探針。由于將Cl替換成了電子吸引力更強的F，它的最大激發(fā)波長會向短波長處偏離10 nm左右。這個波長更接近于氬激光器的波長，所以用氬激光器激發(fā)時，F(xiàn)luo-4的熒光強度比Fluo-3強一倍。Fluo-4, AM穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細胞內(nèi)，F(xiàn)luo-4若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的，但是當它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光，最大激發(fā)波長為494nm，最大發(fā)射波長為516nm。可以使用激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。

?使用說明：for Human T cells

1.????? 1） 試劑?? 2 mM的Fluo-4, AM/DMSO（將1mg Fluo-4, AM溶于442μL DMSO）
Pluronic F127； Hanks balanced salt solution（HBSS）
HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）
（2） 操作
①. 向bioFluo-4, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以??? 防止Fluo-4, AM在HBSS中聚合并能幫助其進入細胞。
②. 用HBSS稀釋Fluo-4, AM溶液，制備4μM的bioFluo-4, AM工作液。
③. 將Fluo-4, AM工作液加入細胞，在37℃培養(yǎng)20分鐘。
④. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS，再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。
⑤. 用HEPES buffer saline洗滌細胞3次，然后用HEPES buffer saline使細胞重懸浮，制成1×105 cells/mL的溶液。
⑥. 37℃下培養(yǎng)10分鐘，然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長494nm，發(fā)射波長516nm。?
*標記的條件因細胞種類而異，在每次實驗前，請先確定最佳條件。以上方法僅供參考。

?保存條件：? -20℃避光保存，有效期一年。

特別提醒：

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅!

2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程！

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