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DiI perchlorate

DiI perchlorate

DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 細(xì)胞膜染料產(chǎn)品描述DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),這類(lèi)染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類(lèi)染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne ...

DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 細(xì)胞膜染料

產(chǎn)品描述

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),這類(lèi)染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類(lèi)染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 DiR的紅外熒光可以穿透細(xì)胞和組織,在活體成像中用來(lái)示蹤。

1.??DiD,DiO,DiI,DiR,DiS的化學(xué)性質(zhì)

目錄號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

分子量

Ex/Em

推薦濾光器*?

DiD

22031

DiD iodide

25mg

959.91

644/663 nm?

XF47-Omega, 31023-Chroma?

22033

DiD labeling solution

10 mL

959.91

644/663 nm?

XF47-Omega, 31023-Chroma?

DiO






22046

DiOC6(3) iodide

100 mg

572.52

482/504 nm?

XF23-Omega, 31001-Chroma?

22066

DiO perchlorate

100 mg

881.7

484/501nm

XF23-Omega, 31001-Chroma?

DiI

22101

DiI iodide

100 mg

961.32

549/565 nm?

XF32-Omega, 31002-Chroma?

22102

DiI perchlorate

100 mg

933.87

549/565 nm?

XF32-Omega, 31002-Chroma?

22103

DiI triflate

100 mg

983.48

549/565 nm?

XF32-Omega, 31002-Chroma?

DiR**

22070

DiR iodide

10 mg

1013.39

748/780 nm?

XF112-Omega, 41009-Chroma?

DiS

22073

DiSC2(3)

25 mg

492.44

560/571 nm?

XF32-Omega, 31002-Chroma?

22076

DiSC3(5)

100 mg

546.53

660/675 nm?

XF47-Omega, 31023-Chroma?

*?Omega濾光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com)Chroma濾光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。

**DiR的發(fā)射波長(zhǎng)肉眼不可見(jiàn),所以需要配備CCD鏡頭或其他的近紅外檢測(cè)儀器。


?使用方法

1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備

(1)配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液:儲(chǔ)存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。

注意:未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C,避免反復(fù)凍融。

(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無(wú)血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)存液,配制濃度為1~5 μM的工作液。

注意:工作液的最終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制??梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找最佳條件。?

2. 懸浮細(xì)胞染色

(1)懸浮細(xì)胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2~20分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

(3)染色細(xì)胞試管在1000~1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。

(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。

(5)重復(fù)(3),(4)步驟兩次以上。

3. 粘壁細(xì)胞的染色

(1)使粘壁的細(xì)胞在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。

(2)從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過(guò)量培養(yǎng)液,將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。

(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

(4)在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 2~20分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

(5)吸干染料工作液,用培養(yǎng)液洗蓋玻片2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。

4. 顯微鏡檢測(cè)

(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見(jiàn)表1。

(2)多色染料的同時(shí)檢測(cè),濾光器按照以下設(shè)定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

5. 流式細(xì)胞儀的檢測(cè)

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1,F(xiàn)L2,F(xiàn)L3和FL4流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

?儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。

特別提醒:

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。

2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗(yàn)服并遵守生物實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程!

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