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中文名：二苯甲亞胺,?三氯化氫2'-(4-羥基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑
英文名：2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
別名：Hoechst 33258，bisBenzimide H 33258，HOE 33258bisBenzimide?H?33258或HOE?33258
性質(zhì)：1.?外觀：黃色粉末??2.?純度：≥99%（HPLC）超純級；CAS#：23491-45-4； 分子式：C25H24N6O · 3HCl； 分子量：533.88
2)???對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，并混勻。室溫放置3-5分鐘。
3)???吸除Hoechst 33258染色液，用TBST?、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
4)???直接在熒光顯微鏡下或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細(xì)胞凋亡時，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
5)???加入適當(dāng)量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96?孔板一個孔需加入100微升染色液。
6)???在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測。?
1)Hoechst 33258對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。
2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
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