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Super Green I for PCR (20× in DMSO)(~Sybr Green)

Super Green I for PCR (20× in DMSO)(~Sybr Green)

Super Green I(20× DMSO溶液,PCR級)Super Green I(可替代Sybr Green)?與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強(qiáng)100~1000倍。在PCR反應(yīng)體系中,加入過量Super Green I熒光染料,它特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,熒光信號增強(qiáng),而不摻入鏈中的SUPER Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。 1.使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響 Super Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關(guān)鍵的因素。如果SUPER Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能...

Super Green I

(20× DMSO溶液,PCR級)

Super Green I(可替代Sybr Green)?與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強(qiáng)100~1000倍。在PCR反應(yīng)體系中,加入過量Super Green I熒光染料,它特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,熒光信號增強(qiáng),而不摻入鏈中的SUPER Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。

1.使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響

Super Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關(guān)鍵的因素。如果SUPER Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出。而在高濃度時,將會抑制PCR反應(yīng),降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用SUPER Green I時應(yīng)根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度,反應(yīng)的終濃度為1×到0.2×之間。

2.Mg2濃度的影響

提高Mg2濃度可以降低Super Green I對PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SUPER Green I進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)時,Mg2濃度比無SUPER Green I 的普通 PCR 反應(yīng)高出0.5~3mM。


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