DuFinder核酸染料(10,000× DMSO溶液)
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本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。
DuFinder產(chǎn)品簡介
Dufinder 是一種新型核酸染料,具有相對安全、靈敏等突出優(yōu)點(diǎn),可以代替溴化乙錠(EB)作為各種核酸電泳的染色劑。與強(qiáng)致癌性的EB不同,Dufinder 屬于花箐類染料,毒性很低,使用安全,可有效保護(hù)實(shí)驗(yàn)操作者和環(huán)境。
Dufinder 與dsDNA 結(jié)合熒光信號可增強(qiáng)800~1000倍,其檢測核酸的靈敏度比EB染色法平均高10倍左右。
Dufinder 染料最大吸收峰為470nm,與該染料結(jié)合的核酸呈現(xiàn)綠色熒光。用可見光凝膠透射儀觀測。也可用紫外凝膠透射儀觀測,但效果稍差。?
DuFinder產(chǎn)品特點(diǎn)
l? 相對安全:盡管可以穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),屬于花菁染料,使用相對安全,富百科AMES實(shí)驗(yàn)顯示在工作濃度(凝膠染色濃度)下沒有發(fā)現(xiàn)致突變性,可以代替致癌物溴化乙錠EB作為各種核酸電泳的染色劑。參考文獻(xiàn):衛(wèi)生研究-2020-49(6)-938
l? 靈敏: 檢測核酸的靈敏度平均高于EB染色法10倍左右。
l? 經(jīng)濟(jì): 價(jià)格低于進(jìn)口同類產(chǎn)品5~10倍。
l? 操作簡單: 本染料有多種使用方法,操作簡單 。
l? 通用性: 適用于多種核酸電泳分析。可以對DNA、RNA、及寡核苷酸等進(jìn)行染色。
l? 兼容性: 對常用酶(如:Taq 酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、連接酶等)沒有抑制作用。
DuFinder使用方法
?方法一:膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時(shí)加入Dufinder 核酸染料。(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL Dufinder? 10,000× 儲液,以此比例類推)。
(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
u? 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
方法二:泡染法
(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
(2) 用PH 7.0~8.5 的緩沖液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1(或10000:2)的比例稀釋Dufinder染料濃縮液,混勻,制成染色溶液,。
(3) 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10~45分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。凝膠越厚、濃度越高,所需染色時(shí)間越長。也可以在聚丙烯酰胺凝膠上直接染色(玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理,避免染料吸附在玻璃表面上)。將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色10~30分鐘。
(4) 觀測。
?DuFinder注意事項(xiàng)及其他說明:
?1. 該染料為花箐類染料,富百科AMES實(shí)驗(yàn)顯示在凝膠染色濃度下無致突變性。
?2. 染料從冰箱中取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫,使溶液充分融化,并混勻。
3. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中,Dufinder可以全部從雙鏈核酸上去掉。
4. Dufinder對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
5. 儲存:儲存于4℃,有效期至少一年。
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