Super Fluor 488,555, 647, 680, 750活化酯標(biāo)記抗體
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Super Fluor SE=Super Fluor?NHS=Super Fluor琥珀酰亞胺酯 (琥珀酰亞胺酯SE(Succinimidyl esters) = N-羥基琥珀酰亞胺NHS(N-Hydroxy succinimide)
Super Fluor?系列可替代Alexa Fluor?系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH 4~10),?更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等熒光染料。
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表?Super Fluor 488,555, 647, 680, 750活化酯的性質(zhì)參數(shù)
488 |
555 |
647 |
680 |
750 |
|
活化酯分子量 |
~900 |
?~1250 |
?~1300 |
~1150 |
?~1300 |
最大吸收波長(zhǎng)(nm) |
494 |
555 |
647 |
680 |
750 |
摩爾吸光系數(shù)(M-1cm-1) |
71 000 |
150 000 |
239 000 |
184000 |
240 000 |
最大發(fā)射波長(zhǎng)(nm) |
524 |
565 |
665 |
702 |
775 |
A280nm?/Amax |
11% |
8% |
3% |
5% |
4% |
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原料準(zhǔn)備:
A.活性染料?1mg;B.碳酸氫鈉?~84mg;C.抗體純化樹(shù)脂P-30/Sephadex G25M/透析袋;D.空柱?5?個(gè);E.收集管?5?個(gè);
注意:純化的蛋白buffer?中不得含有銨離子或伯銨,因?yàn)樗鼈儠?huì)與蛋白質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合活性染料。不純的抗體或者含BSA?或明膠的抗體標(biāo)記效果不好。低濃度的NaN3(<3mM)或thimerosal(<1mM)不影響偶聯(lián)效果。
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活性染料穩(wěn)定性與儲(chǔ)存:未開(kāi)封的粉末在避光干燥-20℃可存放6月。其水溶液現(xiàn)配現(xiàn)用不能儲(chǔ)存。任何溶解后的染料最好立即使用;無(wú)水的DMSO溶液-20°C保存最多2個(gè)星期。
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