SulfoCy7 SE（=Cy7 NHS=Cy7 SE）用于小動(dòng)物活體成像的菁染料

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1.?產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

? ? ? 水溶性菁染料SulfoCy是性能優(yōu)良的熒光標(biāo)記染料,?具有很好的水溶性和很高的摩爾吸光系數(shù)，其琥珀酰亞胺酯是最常用的脂肪氨基標(biāo)記試劑，廣泛用于蛋白、抗體、核酸及其他生物分子的標(biāo)記和檢測(cè)。特別是Cy5.5和Cy7的吸收在近紅外區(qū)，已廣泛用于活體成像領(lǐng)域來代替放射性元素。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)血紅蛋白是吸收可見光的主要成分,?能吸收中藍(lán)綠光波段的大部分可見光;?水和脂質(zhì)主要吸收紅外線, ?因此選擇激發(fā)和發(fā)射光譜位于650nm-900nm(近紅外窗口)的近紅外熒光標(biāo)記的紅光雖然有部分散射消耗但大部分可以穿透哺乳動(dòng)物組織被敏感的CCD檢測(cè)到，更有利于活體光學(xué)成像，特別是深層組織的熒光成像。

2. 裸鼠的活體成像實(shí)例

?SPF級(jí)BALB/C裸鼠，6-8?周齡,?18-20克,?實(shí)驗(yàn)前24 h?自由進(jìn)食、飲水。

??實(shí)驗(yàn)裸鼠麻醉后，將裸鼠俯臥位平放于小動(dòng)物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。實(shí)驗(yàn)時(shí)將Cy7或Cy7標(biāo)記的生物分子或藥物DMSO稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g)?[最佳用量和時(shí)間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化],每5min?記錄1?張動(dòng)物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對(duì)照鼠不注射藥物，進(jìn)行同時(shí)記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器，進(jìn)行成像。

???SulfoCy7?檢測(cè)時(shí)激發(fā)波長(zhǎng)700～770 nm帶通,發(fā)射波長(zhǎng)790 nm長(zhǎng)通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍780～950 nm ,掃描步進(jìn)10 nm。曝光時(shí)間為500 ms。

????不同的藥物代謝時(shí)間不一樣，注射入裸鼠體內(nèi)，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現(xiàn)顯著的腎排泄的特點(diǎn)一般4~6小時(shí)，快得只有30分鐘；如果是骨骼等部位靶點(diǎn)的Cy7標(biāo)記藥物，有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測(cè)到熒光成像。

????器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4小時(shí)以上，0%，20%，30%PBS蔗糖依次沉底，20μm切片，多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片，晾干，DAPI染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖633 nm。

3.?穩(wěn)定性與儲(chǔ)存：

??未開封的粉末在避光干燥-20℃存放12月。SulfoCy NHS水溶液現(xiàn)配現(xiàn)用不能儲(chǔ)存。任何溶解后的SulfoCy NHS粉末最好立即使用；無水的DMSO溶液-20°C保存最多2個(gè)星期(無水DMSO推薦使用SigmaAldrich貨號(hào)276855)。

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