RTGreen(20× 水溶液)
RTGreen ?(可替代?EvaGreen、SYBR Green I, LC Green)?是一種用于實時定量 PCR(qPCR)的DNA結(jié)合染料。該染料的諸多優(yōu)點同EvaGreen和Sybr Green。除了有相似的光譜特性,RTGreen有三個主要特點使它區(qū)別于SYBR Green I和EvaGreen。
1.?兼容快速PCR和多重 PCR:?RTGreen對PCR的抑制性遠小于SYBR Green I,因此使用RTGreen進行的qPCR實驗可以使用快速PCR步驟。同時,RTGreen在實驗中可以使用較高的濃度,從而獲得遠強于SYBR Green I擴增信號。較高濃度的RTGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,使RTGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲線分析(HRM)。該分析正被越來越多的用于PCR后的基因分型和異源雙鏈分析。由于SYBR Green I對PCR的抑制性,從而要求其使用濃度必須很低,因此 SYBR Green I無法解決由低濃度造成的染料重分布問題,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同時,染料重分布問題也可能影響常規(guī)熔解曲線的可靠性,因為低熔點的DNA鏈可能由于這種原因而無法檢測到 。
2.??超強穩(wěn)定性:在正常的儲存、操作和 PCR 過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里,也可以反復凍融。
3.?相對安全性好:富百科內(nèi)部實驗細胞膜穿透性測試表明,RTGreen幾乎不能穿透細胞膜,安全性高。
4.?適合HRM分析:無“染料重分布”缺陷,兼容PCR后的高分辨率熔解曲線(HRM)分析。
5.?優(yōu)越的兼容性:與EvaGreen, Sybr Green光譜相似,和各知名品牌的qPCR儀器兼容。 用RTGreen 替代EvaGreen或者Sybr Green,毋須改變?nèi)魏文壳笆褂玫牟僮鞑襟E和儀器設備。
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