DuGreen?? GelStain?核酸染料(10,000×DMSO溶液)
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?SafeRed?, SafeView?, SafeStain?,DuGreen?和GelStain?為北京富百科生物技術(shù)有限公司注冊商標,未經(jīng)授權(quán)嚴禁使用!
產(chǎn)品描述
? DuGreen是一種油性大分子(分子量>1000),是北京富百科生物技術(shù)有限公司開發(fā)的新型核酸染料。這種獨特的油性大分子不易揮發(fā)升華,不易穿透完整細胞膜進入活體細胞內(nèi),富百科AMES實驗顯示在凝膠染色濃度下沒有發(fā)現(xiàn)誘變性,具有使用相對安全、檢測靈敏等特點,可以作為各種核酸電泳的染色劑,適用于各種片段大小染色。與標準凝膠成像系統(tǒng)和可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置完美兼容,適用于紫外凝膠成像系統(tǒng)或藍色可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置。本公司提供的熒光染料為濃縮的10,000X染料。
產(chǎn)品特點:
1.相對安全:獨特的油性大分子特點使其不易穿透完整細胞膜進入細胞內(nèi),使用相對安全,富百科AMES實驗顯示在工作濃度(凝膠染色濃度)下沒有發(fā)現(xiàn)誘變性,可以代替致癌物溴化乙錠EB作為各種核酸電泳的染色劑。參考文獻:衛(wèi)生研究-2020-49(6)-938
2.靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響較小。
3.穩(wěn)定性高:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定,耐光性強。
4.信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
5.操作簡單:在預(yù)制膠和電泳過程中不降解,可直接用可見光凝膠透射儀觀察。
6.適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
7.完美兼容:適用于使用254nm 激發(fā)的紫外凝膠成像系統(tǒng)或藍色可見光激發(fā)的凝膠觀察裝置。它和SYBR Green I的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩(wěn)定。
產(chǎn)品包裝:?10,000x DuGreen??Nucleic Acid Dye? 500uL?????????????????????儲存條件:?2-8℃避光干燥可保存12個月。
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Figure 1. ?Normalized excitation and emission spectra of DuGreen?(green lines:?Absorption λmax=270nm, 505nm;Emission λmax=525 nm) in?TE buffer with dsDNA;?Normalized excitation and emission spectra of?SafeRed?(red lines:Absorption λmax=290nm, 520nm;Emission λmax=590 nm) in TE buffer with dsDNA
操作步驟:
一、瓊脂糖凝膠電泳染色(詳細方法請下載詳細說明書,推薦方法)
將DuGreen Nucleic Acid Dye加入凝膠中
1.制膠:按常規(guī)操作,制備瓊脂糖凝膠,加入濃縮的10,000xDuGreen,使其在凝膠中的終濃度為1x(例如:制備50ml的凝膠,加入染料5μl),輕輕搖勻,倒膠。
? ??2.按常規(guī)方法電泳,觀測結(jié)果。
二、泡染法??
(1)按照以上常規(guī)方法進行電泳。?用于膠回收等高濃度DNA樣品強烈推薦泡染法!
(2)將DuGreen10,000×儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl溶液中制成3×染色液。例如將15μL DuGreen10,000×原裝液加入到50mL 0.1M NaCl溶液中。
(3)將凝膠小心地放入合適的容器中(如聚丙烯容器中)緩慢加入足量的3×?染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,最佳染色時間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含1%的凝膠,染色時間約30min。?
(4)用302nm激發(fā)的紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。
注意事項:請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1.??由于DuGreen??具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將DuGreen??儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。DuGreen??兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
2.??如果條帶總是彌散或分離不理想,請使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關(guān),請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
3.??DuGreen?對玻璃器皿和非聚丙烯材料具有一定的親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
4.??對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
特別提醒:
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!