無血清細(xì)胞凍存液
產(chǎn)品簡介：
隨著實驗室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展，除了原代培養(yǎng)之外，人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要。通用無血清快速細(xì)胞凍存液，是一種新型開發(fā)的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液，不含動物來源的血清成分，能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力，減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷，從提高細(xì)胞復(fù)蘇時的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時低溫保護(hù)劑獲得稀釋，稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜，這是因為當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋以后，該濃度一般不會對細(xì)胞造成毒性損傷。凍保存細(xì)胞系的優(yōu)點如下：1.?無動物來源血清成分，化學(xué)成分明確。2.?快速冷凍，可直接置于-80℃冰箱冷凍，3.減少基因漂移；4減緩細(xì)胞系的衰老；5、穩(wěn)定表型；6、減少微生物污染及交叉污染機(jī)會等。盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷，有效提高細(xì)胞的凍存效率和復(fù)蘇活力。多數(shù)細(xì)胞復(fù)蘇效率可高達(dá)90%。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時低溫保護(hù)劑獲得1:10～1:20的稀釋，稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜，這是因為當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋10～20倍以后，該濃度一般不會對細(xì)胞造成毒性損傷。通用凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基、DMSO等組成，不含血清，是一種經(jīng)典的無菌凍存液。適用于用于各種哺乳動物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存。
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產(chǎn)品組成：無血清細(xì)胞凍存液50mL/200元??
保存：4℃保存1年；?-20℃?2年
自備材料：細(xì)胞計數(shù)器/細(xì)胞凍存管/超低溫冰箱或液氮/超凈工作臺
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操作步驟(僅供參考)：
1、?培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長晚期，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等，取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。如為貼壁生長細(xì)胞，用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；如為懸浮生長細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
2、?500～1000g離心5min，離心去除上清培養(yǎng)液。
3、?加入適量的通用細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1～5×106/ml，將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中，密閉、不要擰的太緊，避免彎曲變形。
4、?一般遵循1℃/min的速率進(jìn)行冷凍。亦可采用4℃?20min，-20℃?30min，-80℃ 冰箱過夜，最后置于液氮罐中長期存儲。
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注意事項：
1、???注意在超凈工作臺內(nèi)無菌操作，盡量避免污染。
2、???請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存
3、???凍存液加入細(xì)胞后，請盡快放入-80℃冰箱凍存；
4、???若需長期凍存細(xì)胞，請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存
5、???初次使用融化后可在4℃保存1個月，但應(yīng)減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
6、???雜交瘤細(xì)胞凍存時應(yīng)定期復(fù)蘇，檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。
特別提醒：
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。
2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程！
