Hoechst 33342
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中文名:二苯甲亞胺,?三氯化氫2'-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑
英文名:2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
別名:Hoechst 33342,bisBenzimide H 33342,HOE 33342?
結(jié)構(gòu)式:
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性質(zhì):1.?外觀:黃綠色粉末????2.?純度:≥99%(HPLC)超純級(jí); 分子式:C27H28N6O?·3HCl;分子量:561.93;CAS#:23491-52-3
產(chǎn)品描述:
Hoechst染料是一類在顯微觀察中標(biāo)記DNA的熒光染料。因?yàn)檫@類熒光染料能標(biāo)記DNA,所以它們也經(jīng)常用于細(xì)胞核和線粒體的顯像觀察。這類染料中兩個(gè)相關(guān)的染料Hoechst 33258和Hoechst 33342經(jīng)常使用。這兩種染料都在紫外光下350nm處被激發(fā),都在461nm處最大發(fā)射光附近發(fā)射藍(lán)/青色熒光。Hoechst染料可以用于活細(xì)胞或者固定化細(xì)胞,并且經(jīng)常用來代替其它核酸染料如DAPI。這兩種染料關(guān)鍵的不同點(diǎn)在于,Hoechst 33342加有乙基,這使它具有更強(qiáng)的親脂性,因此能更好的透過完整的細(xì)胞膜。在一些實(shí)驗(yàn)中,Hoechst 33258的滲透性明顯比Hoechst 33342要弱些。這些染料也可以用來檢測(cè)樣品中的DNA含量,通過繪制發(fā)射光強(qiáng)度與DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
Hoechst 33342是一種可透過細(xì)胞膜并對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。Hoechst 33342常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長分別為350 nm和460 nm。
Hoechst 33342溶于水,溶解度可達(dá)20mg/mL。
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染色程序:
(1)???用PBS或合適的緩沖液制備10~50μM Hoechst33342染料。
(2)???將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Hoechst染料溶液加入細(xì)胞培養(yǎng)物中(可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養(yǎng)基)。
(3)???在37℃培養(yǎng)細(xì)胞10~20分鐘。
(4)???用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。
(5)???用帶有350nm激發(fā)波長,460nm發(fā)射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
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儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
注意事項(xiàng):
Hoechst 33342對(duì)人體有一定刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
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