【產(chǎn)品簡介】
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BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽+NBT (四唑硝基藍(lán))?是堿性磷酸酶(AP)最佳的底物組合之一。在堿性磷酸酶的催化下,BCIP會被水解而產(chǎn)生強反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物與NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色化合物。該試劑盒可用于AP系統(tǒng)的IHC?和Western Blot?實驗的酶促顯色。在AP催化下,在組織切片或印跡膜上結(jié)合了AP偶聯(lián)物的地方產(chǎn)生深藍(lán)色沉淀,可根據(jù)顏色反應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達(dá)情況。
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【產(chǎn)品組分】
40×BCIP?????????????1 ml
40×NBT??????????????1 ml
BCIP/NBT Buffer??????40 ml
【使用方法】
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1.BCIP/NBT顯色工作液配制:
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根據(jù)需要量,將40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的體積比混勻后,即為BCIP/NBT顯色工作液。
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2.顯色:
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1)印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或?qū)⒂≯E膜傾入到BCIP/NBT顯色工作液中),室溫避光孵育3-10分鐘。顯色完畢后,將膜浸入水中,終止反應(yīng)。
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2)組織切片或細(xì)胞爬片顯色:滴加適量的BCIP/NBT顯色工作液于需要顯色的組織切片或細(xì)胞爬片上,室溫避光孵育3-10分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時間,當(dāng)達(dá)到最佳顯色效果后,自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明,封片后可長期保存。
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【注意事項】
1.工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,配制好的工作液1小時內(nèi)有效。
2.工作液用量必需充足,保證完全覆蓋組織片或印跡膜。?
3.為獲得最佳實驗結(jié)果,請務(wù)必優(yōu)化實驗條件。?
4.NBT有毒,使用時請采取必要的防護(hù)措施。?
特別提醒:
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!