BCECF, AM

CAS#：117464-70-7

中文名：2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基熒光素乙酰甲酯

英文名：2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester

結(jié)構(gòu)式：

?

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分子式：C₃₉H₃₆O₁₉

分子量：808.69

性質(zhì)：

1.?外觀：白色粉末

2.?純度：≥90% (HPLC)

3.?產(chǎn)品描述：????

BCECF, AM是一種可以穿透細(xì)胞膜檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)pH的熒光染料。BCECF, AM沒(méi)有熒光，進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成BCECF，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。BCECF在適當(dāng)?shù)?/span>pH值情況下可以被激發(fā)形成綠色熒光。最大激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)因pH的不同而有所不同，最大激發(fā)波長(zhǎng)在503nm左右，最大發(fā)射波長(zhǎng)在520nm左右，實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm，發(fā)射波長(zhǎng)為535nm。

BCECF, AM不僅被廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究，也有報(bào)道用于動(dòng)物組織、植物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等的細(xì)胞內(nèi)pH水平檢測(cè)。在有細(xì)胞內(nèi)pH變化的細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞粘附、藥物抵抗、細(xì)胞趨化等過(guò)程中BCECF, AM被廣泛應(yīng)用。
????用于細(xì)胞內(nèi)pH檢測(cè)時(shí)，常用的BCECF, AM的濃度為1~10μM。

4.?操作說(shuō)明(for Human Neutrophil)*
（1）試劑
1 mM的BCECF, AM/DMSO?
HEPES?緩沖液（20 mM HEPES, 153 mM NaCl, 5 mM KCl, 5 mM glucose, pH 7.4）
（2）操作
①.?用HEPES制備細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度為4×10⁷個(gè)/mL。

②.?將1mM的BCECF, AM/DMSO溶液加入細(xì)胞懸液中（細(xì)胞懸液的1/300體積），BCECF, AM終濃度為3μM。

③.?在37 oC培養(yǎng)30分鐘。
④.?用HEPES緩沖液清洗細(xì)胞3次，制成3×10⁶個(gè)/mL的細(xì)胞懸液。

⑤.?使用熒光顯微鏡或帶有圖像分析系統(tǒng)的激光共聚顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度。

*標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先確定最佳條件。以上方法僅供參考。

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

注意事項(xiàng)：?

1）BCECF, AM可能對(duì)人體有害，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

2）熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

特別提醒：

1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。

2)?本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗(yàn)服并遵守生物實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程！